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ELISA試劑盒顯色溫育反應
点击次数:114 发布时间:2019-08-27
          ELISA試劑盒广泛应用在免疫学检验的各领域中,有着灵敏度高、特异性强、经济性较好等优点,下面我们来说说ELISA試劑盒的显色温育反应。
  ELISA試劑盒約40分鍾顯色達頂峰,隨即逐漸減弱,至2小時後即可完全消退至無色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間(12-24小時)不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。
  ELISA試劑盒实验中显色是ELISA試劑盒中的zui后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,ELISA試劑盒加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色可在室温进行,时间一般不需要严格控制,有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显se情况适当缩短或,及时判断。
  ELISA試劑盒的实验操作程序简述:
  1.准備試劑,樣品和標准品;
  2.加入准備好的樣品和標准品,37℃反應30分鍾;
  3.洗板5次,加入酶標試劑,37℃反應30分鍾;
  4.洗板5次,加入顯色液A、B,37℃反應10分鍾;
  5.加入終止液;
  6.15分鍾之內度OD值;
  7.計算。
 
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